《植物生理学报》 2006, 42(6): 1063-1066

红花石蒜茎尖的玻璃化超低温保存

林田¹ 刘灶长^1,* 李天菲¹ 李锡香² 罗利军^1,*

1 上海市农业生物基因中心，上海 201106；2 中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081

通信作者：刘灶长；E-mail: lzc@sagc.org.cn, lijun@sagc.org.cn；Tel: 021-52230526

摘　要：

2~3 mm 的石蒜茎尖放在 MS+0.4 mol•L-1 蔗糖的培养基上预培养 5 d，在 25℃下用预处理液处理 20 min，接着用冰浴 的玻璃化保护剂 PVS2 在冰浴中处理 80 min 后，换新鲜 PVS2 并迅速投入液氮。液氮保存 24 h 后，于 40℃水浴中快速解 冻 2 min，用 MS+1.2 mol•L-1 蔗糖的液体培养基洗涤 20 min，滤纸吸干后接种到恢复培养基中，在 25℃下暗培养 7 d 后， 转入光照强度为 36 µmol•m-2•s-1 和光暗周期 12/12 h 条件下培养。2 周后的成活率最高可达 90%，植株再生率达 53%。

关键词：红花石蒜；茎尖培养；玻璃化法；超低温保存

收稿：2006-07-11   修定：2006-11-09

资助：上海市科技兴农重点攻关项目[沪农科攻字(2005)第1-6号]。

红花石蒜茎尖的玻璃化超低温保存

林田¹ 刘灶长^1,* 李天菲¹ 李锡香² 罗利军^1,*

1 上海市农业生物基因中心，上海 201106；2 中国农业科学院蔬菜花卉研究所，北京100081

Corresponding author: ; E-mail: lzc@sagc.org.cn, lijun@sagc.org.cn; Tel: 021-52230526

Abstract:

2~3 mm 的石蒜茎尖放在 MS+0.4 mol•L-1 蔗糖的培养基上预培养 5 d，在 25℃下用预处理液处理 20 min，接着用冰浴 的玻璃化保护剂 PVS2 在冰浴中处理 80 min 后，换新鲜 PVS2 并迅速投入液氮。液氮保存 24 h 后，于 40℃水浴中快速解 冻 2 min，用 MS+1.2 mol•L-1 蔗糖的液体培养基洗涤 20 min，滤纸吸干后接种到恢复培养基中，在 25℃下暗培养 7 d 后， 转入光照强度为 36 µmol•m-2•s-1 和光暗周期 12/12 h 条件下培养。2 周后的成活率最高可达 90%，植株再生率达 53%。

Key words: 红花石蒜；茎尖培养；玻璃化法；超低温保存